Alat Rapid Antigen: Базовые знания обнаружения нуклеиновой кислоты - часть 2

Алат быстрый антиген: знать обнаружение нуклеиновой кислоты

Флуоресценция в реальном времени количественная ПЦР

Технология флуоресценции в реальном времени относится к способу добавления флуоресцентных групп в реакционную систему ПЦР, используя флуоресцентные сигналы для контроля всего процесса ПЦР в режиме реального времени, и, наконец, количественно анализируя неизвестный шаблон через стандартную кривую.

Принцип этой технологии заключается в том, чтобы отметить зонд с флуоресцентной группой, отметьте флуоресцентную группу r на 5'-конце и отметьте группу гасителя Qна 3'-конце. Когда нет амплификации ПЦР, флуоресцентная группа гасила и не издает флуоресценцию из-за близкого пространственного расстояния между флуоресцентной группой и группой гашения; когда ПЦР усиливается, грунтовка и флуоресцентный помеченный специфический зонд объединяются на шаблон в то же время. Положение связывания между флуоресцентным меченым зондом и шаблоном расположена между восходящими и нисходящими праймерами. Флуоресцентный зонд гидролизован с помощью 5 '3' экзонуклеазной активности эконуклеазной активности фермента Taq, а флуоресцентная группа выделяется. Поскольку он отделен от гася группы в пространстве, он излучает флуоресценцию. Излучаемая флуоресценция может быть обнаружена флуоресцентным зондом, усиливаемым и обнаруженным в то же время, чтобы реализовать \"реальное \" обнаружение \". Это технология не Осуществляет только прыжок ПЦР из полученных количественных к количественным, но также имеет характеристики прочной специфичности, высокой степени автоматизации и эффективно решения проблемы загрязнения ПЦР по сравнению с обычной ПЦР.

Разветвленная пряди ДНК обнаружение - BDNA

BDNA - это метод количественного обнаружения РНК 1 типа ВИЧ в плазме. БДНК относится к синтетическому фрагменту ДНК с боковыми цепями. Каждая боковая цепь может быть помечена возбужденным маркером. РНК ВИЧ выделяется из вирусных частиц центрифугированием, а затем захвачена в микропоры с помощью зонда захвата

Специально связывается с другой частью вирусной РНК, а также связывается с предварительным усиленным зондом. Последнее затем гибридизуется с помощью зонда амплификации, BDNA-зондом. Два набора целевых зондов, специально связывающихся с различными областями гена положения вирусных rna.Hivrna олигонуклеотид. Оформины в микропорах. Сигнал хемилюминесценции может быть амплифицирован после инкубации с хемилюминесценцией субстрата. Это количественно определяется сияющей интенсивностью, которая пропорциональна содержанию HIVRNA в образец. BDNA не имеет перекрестного загрязнения ампликонов, что является большим прогрессом По сравнению с PCR.BDNA имеет десятки зондов, охватывающих весь геном, который может легко обнаружить некоторые варианты ВИЧ, но чувствительность не такой чувствительна, как ПЦР. Улучшение чувствительности БДНК является серьезной трудностью.

Шаги обнаружения

Процесс обнаружения нуклеиновой кислоты ВИЧ-ну нуклеиновой кислоты делятся на экстракцию нуклеиновой кислоты, обратная транскрипция синтеза кДНК, реакцию амплификации ПЦР, качественный анализ продуктов усиления, результат.